1986年,郑伊健在参加TVB新秀歌唱大赛,结果进了前100名。后受到电视台邀请去试镜, 由此进入武术艺员进修班学习。但是郑伊健性格羞涩,不爱说话,加上紧张的缘故,三个月后结业时因成绩差被淘汰了。之后,郑伊健在写字楼找到一份文员的工作,做了几个月,他觉得自己不适合这种工作。这时“无线”艺员训练班招考艺人,他觉得自己喜欢演戏,决定再试一次,后成功进入无线电视艺员训练班。
1987年,拍摄第一部电视剧《镭射青春》。而后调至TVB儿童组主持儿童节目《430穿梭机》、《动向索引》及《青春前线》,并担任青少年大使 。
1990年,得到导演李国立的赏识调回剧集组拍摄电视剧《天若有情》,而后与陈松伶合作拍摄的电视剧《月儿弯弯照九州》 大受欢迎,此后成为银幕情侣档,受TVB创始人邵逸夫钦点为金童玉女。
1991年至1993年间,主演根据金庸小说改编的古装剧《中神通王重阳》、《金蛇郎君》、《南帝北丐》 等,和陈松伶合作仙侠剧《蜀山奇侠之仙侣奇缘》 ,扮演一个亦正亦邪的血魔,在清装剧《孤星剑》中主演杀手,警匪剧《九反威龙》中饰演警察,第三度与陈松伶合作主演时装剧《92钟无艳》 。
1992年,郑伊健拍摄第一部电影《现代应召女郎》,同刘嘉玲合作饰演一位纯情的处男,凭借此片获得第11届香港金像奖最佳新人奖提名。
1993年到1994年间,参与拍摄了王晶导演的电影《追男仔》、《超级学校霸王》、《新英雄本色》、《男儿当入樽》、《人鱼传说》五部电影。
1994年,与陈松伶合作电视剧《婚姻物语》 以及台庆剧《笑看风云》 。《笑看风云》被票选为90年代最受欢迎电视剧剧集。
1995年到1999年,郑伊健主演了根据漫画改编的电影《古惑仔之人在江湖》《古惑仔之猛龙过江》《古惑仔之只手遮天》《古惑仔之战无不胜》《古惑仔之龙争虎斗》《古惑仔之胜者为王》中的陈浩南。郑伊健凭借《古惑仔》中陈浩南走红。《古惑仔》前三部作为限制级电影每部票房超2000万。《古惑仔》系列掀起了香港改编漫画为电影的热潮。
1996年,郑伊健和郑秀文合作了改编自漫画的两部电影《百分百感觉》及《百分百啱feel》饰演男主角,两部电影票房分别破2000万和1500万。
1997年,郑伊健拍摄电影《风云之雄霸天下》饰演男主角聂风。《风云之雄霸天下》票房收入达4150万港币,成为1998年全香港电影的票房冠军。
唯一长发而好看的男子,唱歌进步慢,但他声底好,试放多些时间去练声练唱,他便早已上位,跳舞也要学好些。他最大的优点是有观众缘。(师父罗文评)
郑伊健因拍摄《古惑仔》系列电影,成为众人追捧的对象,并开启了香港地区电影的一个“江湖”时代,也在无数影迷心中留下了难忘的回忆。电影中的郑伊健,演古惑仔时有型有款,成熟稳重,做歌手唱歌时则情深款款,与现实中的他判若两人。 郑伊健有着纯真性情,面对媒体的许多问题他拒绝得直接、不留情面,让气氛陷入尴尬中,自己却处之泰然。并且习惯以一种毫不掩饰的不信任的眼神逼视着坐在自己对面的人。个性强、憎恶分明、不擅做表面功夫,所以总是让自己身处极端境地。有深交的人,觉得他内心坦荡透明 碰一两次面的,又觉得他是只刺猬,处处伤人。经受过大起大落的他早已适应了人生的变化莫测。入行以后也没野心,通达而又随遇而安,从不想做事做足100分,只希望拍戏拍好一点唱歌唱好一点,在进步便可以。(搜狐娱乐评)