正常时的胆汁是无菌的，胆汁细菌学的检验，对于胆囊和胆道内细菌感染的诊断有重要意义。做细菌培养时，一般将化脓菌的沉淀物接种于血琼脂平皿及麦康凯皿接种于肉汤培养基中增菌，35℃环境中18～24小时后观察有无细菌生长。并做进一步鉴定，48小时培养无菌生长方可报告。细菌生长后按各类细菌的生物学特性进行，鉴定厌氧菌时将胆汁沉淀物接种于厌氧血平皿，按厌氧培养分离技术进行。

一般胆汁采取的方法有3种，即十二指肠引流法，胆囊穿刺法及手术直接采取法。

1.十二指肠引流法

在无菌操作下用导管做十二指肠引流采集，所采胆汁分A、B、C三部分。因采集时通过口腔，常易混入口腔正常菌群，所以一般认为B液作细菌培养意义较大。

2.胆囊穿刺法

在进行胆囊造影术时，可同时采取胆汁。本法所采集的胆汁不易污染，适宜做细菌培养。

3.手术采取法

在进行胆囊及胆管手术时可由胆总管、胆囊直接穿刺采取胆汁。本法所采集的胆汁也不容易污染，适合做细菌学检验。

以上采集的胆汁标本应立即送检，或保存于4℃冰箱内。

检查是否为细菌感染。正常人的胆汁是无菌的。胆道感染患者的胆汁中，主要为革兰阴性杆菌，但混合感染较多见。经手术取得的胆汁，如有细菌生长，可认为是感染病原菌。经十二指肠引流采集的标本常混有唾液及胃液，如发现有奈瑟细菌、草绿色链球菌，则可能是来自唾液的细菌；如为大肠埃希菌。肺炎克雷伯菌且细菌计数＞10⁴/ml时，则常为病原菌。

培养无菌生长。